Dominująca podobna do TH2 populacja T-Lymphocytów oskrzelowo-pęcherzykowych w astmie atopowej ad 5

Pozytywne sygnały pojawiają się jako gęste zbiory srebrnych ziaren pokrywających komórki (strzałki). Figura 5. Figura 5. Autoradiograf pokazujący sygnały z komórek BAL od osobnika z astmą hybrydyzowaną z antysensowną riboprobe do GM-CSF. Pozytywne sygnały pojawiają się jako gęste zbiory srebrnych ziaren pokrywających komórki (strzałki).
Pozytywne sygnały hybrydyzacji in situ dla mRNA cytokiny obserwowano jako gęste zbiory ziaren srebra leżących nad komórkami BAL na autoradiografach tylko wtedy, gdy użyto sond antysensownych (Fig. do 6). Nie było sygnałów ze szkieletów cytospinii BAL hybrydyzowanych z sondami sensownymi, ani ze szkiełek wstępnie traktowanych RNazą. Wystąpił silny pozytywny sygnał z pozytywnych próbek kontrolnych cytospiny. Zmienną liczbę pozytywnych sygnałów hybrydyzacji obserwowano dla każdej cytokiny zarówno u osobników z astmą, jak iz grupy kontrolnej. MRNA cytokin dla interleukiny-2, 3, 4 i 5 wydawało się zlokalizowane w mniejszych komórkach, podczas gdy hybrydyzacja in situ mRNA GM-CSF dała ziarna srebrne zarówno na dużych, jak i małych komórkach (ryc. 5).
Figura 7. Figura 7. Liczba komórek z pozytywnymi sygnałami dla mRNA dla interleukiny-2, 3, 4 i 5, GM-CSF i interferonu Gamma w płynie BAL od 10 osobników z astmą i 10 osobników kontrolnych. Istotnie więcej komórek było pozytywnych dla mRNA interleukiny-2, 3,4 i 5 i GM-CSF, ale nie dla mRNA interferonu gamma u osób z astmą. Wartości zostały porównane za pomocą testu U Manna-Whitneya. Słupki wskazują wartości mediany.
Figura 7 pokazuje liczbę komórek na 1000 w preparatach BAL cytospin eksprymujących mRNA dla cytokin. Stwierdzono zwiększoną liczbę komórek eksprymujących mRNA dla interleukiny-2, 3, 4 i 5 oraz GM-CSF w preparatach cytospin BAL u osobników z astmą w porównaniu z preparatami kontrolnymi. Przeciwnie, nie było różnicy w liczbie komórek wyrażających mRNA dla interferonu gamma.
Podwójna fluorescencja dla CD3 i mRNA dla interleukiny-4 lub 5 w preparatach cytospin BAL z trzech pacjentów z astmą wykazała, że średnia z 91% komórek pozytywnych dla mRNA interleukiny-5 była dodatnia dla CD3 (89%, 92% i 91%). procent u trzech osobników) i 58 procent komórek CD3-dodatnich ulegało ekspresji mRNA interleukiny-5. Dziewięćdziesiąt dwa procent komórek eksprymujących mRNA dla interleukiny-4 było dodatnich pod względem CD3 (97%, 91% i 88%), a 73% komórek CD3-dodatnich ulegało ekspresji mRNA interleukiny-4.
Tabela 2. Tabela 2. Związek sygnałów interleukiny 4 i 5 mRNA z komórkami dodatnimi pod względem CD2 od pięciu pacjentów z astmą. Figura 8. Figura 8. Autoradiografy preparatów cytospinowych komórek BAL od osobników z astmą po hybrydyzacji in situ z antysensownymi sondami interleukiny-5 i sortowaniem immunomagnetycznym z kulkami połączonymi z CD2. W panelu A dodatni sygnał hybrydyzacji mRNA interleukiny-5 obserwuje się w połączeniu z komórkami CD2-dodatnimi w pozytywnie dobranej próbce. W panelu B w próbce negatywnej nie wykryto komórek wykazujących ekspresję mRNA interleukiny-5 w celu wykluczenia komórek CD2-dodatnich.
Wyniki zliczeń komórek i hybrydyzacji in situ dla mRNA dla interleukiny-4 i 5 w preparatach cytowirówki BAL po immunomagnetycznym wzbogaceniu lub zubożeniu komórek CD2-dodatnich (limfocyty T), razem z wynikami w nierozdzielonych komórkach BAL, przedstawiono w tabeli 2 dla pięciu pacjentów z astmą
[podobne: odbudowa zęba włóknem szklanym, olx witkowo, nfz zielona góra praca ]